Cho-roinn sinn grunn bheachdan an t-seachdain sa chaidh airson a bhith a’ cleachdadh electrophoresis membran ceallalose acetate, agus cuiridh sinn crìoch air a’ chuspair seo an seo an-diugh airson do iomradh.
Taghadh de Dùmhlachd Buffer
Tha an dùmhlachd bufair a thathas a’ cleachdadh ann an electrophoresis membran ceallalose acetate sa chumantas nas ìsle na an ìre a thathas a’ cleachdadh ann an electrophoresis pàipeir. An pH a chleachdar gu cumanta 8.6BMar as trice bidh bufair arbital air a thaghadh taobh a-staigh raon 0.05 mol / L gu 0.09 mol / L. Nuair a bhios tu a’ taghadh an dùmhlachd, thèid co-dhùnadh tòiseachaidh a dhèanamh. Mar eisimpleir, ma tha fad an stiall membran eadar na dealanan anns an t-seòmar electrophoresis 8-10cm, tha feum air bholtadh de 25V gach ceudameatair de fhad membran, agus bu chòir an dian gnàthach a bhith 0.4-0.5 mA gach ceudameatair de leud membran. Mura tèid na luachan sin a choileanadh no a dhol thairis air rè electrophoresis, bu chòir an dùmhlachd bufair a mheudachadh no a lagachadh.
Bidh dùmhlachd bufair ro ìosal a’ leantainn gu gluasad luath de na còmhlain agus àrdachadh ann an leud a’ chòmhlain. Air an làimh eile, cuiridh dùmhlachd bufair ro àrd maill air imrich a’ chòmhlain, ga dhèanamh duilich eadar-dhealachadh a dhèanamh air bannan dealachaidh sònraichte.
Bu chòir a thoirt fa-near, ann an electrophoresis membran ceallalose acetate, gu bheil cuid mhath den t-sruth air a dhèanamh tron sampall, a tha a ’gineadh tòrr teas. Aig amannan, is dòcha gu bheilear den bheachd gu bheil an dùmhlachd bufair taghte iomchaidh. Ach, fo chumhachan àrdachadh teothachd àrainneachdail no nuair a bhios tu a’ cleachdadh bholtaids nas àirde, faodaidh falmhachadh uisge mar thoradh air an teas a dhol am meud, a’ leantainn gu dùmhlachd bufair ro àrd agus eadhon ag adhbhrachadh gum bi an membran a’ tiormachadh a-mach.
Meud sampall
Ann an electrophoresis membran ceallalose acetate, tha an ìre de shampall air a dhearbhadh le diofar fhactaran, a’ gabhail a-steach suidheachaidhean electrophoresis, feartan an t-sampall fhèin, dòighean staining, agus dòighean lorgaidh. Mar phrionnsapal coitcheann, mar as motha a tha an dòigh lorgaidh mothachail, is ann as lugha a bhios an tomhas-lìonaidh, a tha buannachdail airson dealachadh. Ma tha an àireamh sampall cus, is dòcha nach bi na pàtrain dealachaidh electrophoretic soilleir, agus faodaidh staining a bhith a’ toirt ùine cuideachd. Ach, nuair a bhios tu a’ dèanamh mion-sgrùdadh cainneachdail air na bannan dhathte dealaichte a’ cleachdadh dòighean lorgaidh elution colorimetric, cha bu chòir meud an t-sampall a bhith ro bheag, oir faodaidh e leantainn gu luachan sùghaidh nas ìsle airson cuid de cho-phàirtean, a’ leantainn gu mearachdan nas àirde ann a bhith ag obrachadh a-mach an susbaint. Ann an leithid de chùisean, bu chòir an àireamh sampall àrdachadh gu h-iomchaidh.
Mar as trice, tha an tomhas sampall a chaidh a chur ris air gach ceudameatair den loidhne tagraidh sampall a’ dol bho 0.1 gu 5 μL, co-ionann ri sampall de 5 gu 1000 μg. Mar eisimpleir, ann am mion-sgrùdadh electrophoresis pròtain serum àbhaisteach, mar as trice chan eil an tomhas-lìonaidh a chaidh a chur ris air gach ceudameatair den loidhne tagraidh nas àirde na 1 μL, co-ionann ri 60 gu 80 μg de phròtain. Ach, nuair a bhios tu a’ dèanamh anailis air lipoproteins no glycoproteins a’ cleachdadh an aon dòigh electrophoresis, feumar meud an t-sampall a mheudachadh a rèir sin.
Gu crìch, bu chòir an tomhas sampall as freagarraiche a thaghadh stèidhichte air suidheachaidhean sònraichte tro shreath de dheuchainnean tòiseachaidh.
Taghadh Fuasgladh Staining
Mar as trice bidh na bannan sgaraichte ann an electrophoresis membran ceallalose acetate air an dath mus lorgar iad. Feumaidh diofar phàirtean sampall diofar dhòighean dathaidh, agus is dòcha nach bi na dòighean staining a tha freagarrach airson electrophoresis membran ceallalose acetate gu tur iomchaidh airson pàipear sìoltachain.
Tha trì prìomh phrionnsabalan ann airson fuasgladh staining a thaghadhmembran ceallalose acetate. An toiseach,Bu chòir dathan a tha soluiteach ann an uisge a bhith nas fheàrr na dathan a tha soluiteach le alcol gus crìonadh membran agus deformachadh air adhbhrachadh le fuasgladh staining an tè mu dheireadh a sheachnadh. Às deidh dha staining, tha e cudromach an membran a nighe le uisge agus an ùine staining a lughdachadh. Rud eile, dh’ fhaodadh gum bi an membran air a lùbadh no air a lughdachadh, a bheireadh buaidh air lorg às deidh sin.
San dàrna h-àite, tha e nas fheàrr dathan a thaghadh le dàimh làidir staining airson an sampall. Ann an electrophoresis membran ceallalose acetate de phròtainean serum, thathas a ’cleachdadh amino dubh 10B gu cumanta air sgàth an dàimh làidir staining a th’ aige airson diofar phàirtean pròtain serum agus cho seasmhach ‘s a tha e.
San treas àite, bu chòir dathan càileachd earbsach a thaghadh. Faodaidh cuid de dhhathan, a dh’ aindeoin an aon ainm, a bhith ann an neo-chunbhalachd a dh’ adhbhraicheas cùl-raon gu math dorcha às deidh dha staining. Faodaidh seo eadhon na bannan a bha air an deagh sgaradh bho thùs a mhilleadh, gan dèanamh duilich eadar-dhealachadh a dhèanamh orra.
Mu dheireadh, tha e cudromach an taghadh de fhuasgladh fuasgladh staining. Gu teòiridheach, dh’ fhaodadh gum biodh e coltach gun toireadh dùmhlachd fuasgladh staining nas àirde gu staining nas mionaidiche de cho-phàirtean sampall agus toraidhean staining nas fheàrr. Ach, chan eil seo fìor. Tha crìoch sònraichte aig a’ cheangal ceangail eadar na pàirtean sampall agus an dath, nach eil a’ dol am meud leis an àrdachadh ann an dùmhlachd fuasgladh staining. Air an làimh eile, tha dùmhlachd fuasgladh staining ro àrd chan ann a-mhàin a’ caitheamh an dath ach cuideachd ga dhèanamh duilich cùl-fhiosrachadh soilleir a choileanadh. A bharrachd air an sin, nuair a ruigeas an dian dath luach as àirde sònraichte, chan eil lùb sùghaidh an dath a’ leantainn dàimh sreathach, gu sònraichte ann an tomhasan cainneachdail.
Fiosrachadh airson eòlas fhaighinn air Bith-theicneòlas Beijing Liuyi's membran ceallalose acetatetanca electrophoresis agus an tagradh electrophoresis aige, tadhal air an seo:
lDeuchainn airson pròtain serum a sgaradh le Cellulose Acetate Membrane
lElectrophoresis membran ceallalose acetate
Ma tha plana ceannach sam bith agad airson ar bathar, na bi leisg fios a chuir thugainn. Faodaidh tu teachdaireachd a chuir thugainn air post-d[post-d fo dhìon]neo[post-d fo dhìon], no cuir fòn thugainn aig +86 15810650221 no cuir Whatsapp +86 15810650221, no Wechat: 15810650221.
Iomradh:Electrophoresis (dàrna deasachadh) le Mgr Li
Ùine puist: Jun-06-2023