Prionnsabal deuchainn
Tha electrophoresis hemoglobin ag amas air diofar hemoglobin àbhaisteach agus neo-àbhaisteach a lorg agus a dhearbhadh.
Mar thoradh air na cosgaisean eadar-dhealaichte agus puingean isoelectric de dhiofar sheòrsaichean hemoglobin, ann am fuasgladh bufair pH sònraichte, nuair a tha puing isoelectric hemoglobin nas ìsle na pH an fhuasglaidh bufair, bidh hemoglobin a ’giùlan cosgais àicheil agus a’ gluasad a dh ’ionnsaigh an anod rè electrophoresis. Air an làimh eile, bidh hemoglobin le cosgais adhartach a 'gluasad a dh'ionnsaigh a' chatod.
Fo bholtadh sònraichte agus às deidh ùine electrophoresis sònraichte, bidh hemoglobins le diofar chosgaisean agus cuideaman moileciuil a ’nochdadh diofar stiùiridhean agus astaran imrich. Leigidh seo le sònaichean sònraichte a sgaradh, agus faodar mion-sgrùdadh dath-mheatrach no sganadh electrophoretic a dhèanamh air na sònaichean sin gus diofar hemoglobins a thomhas. Is e an dòigh as cumanta pH 8.6 electrophoresis membran ceallalose acetate.
Taobh a-staigh an cytoplasm, tha buidhnean ethylene glycol (CHOH-CHOH) a tha an làthair ann an stuthan glycogen no polysaccharide (leithid mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycolipids, msaa) air an oxidachadh le searbhag ràitheil agus air a thionndadh gu buidhnean aldehyde (CHO-CHO). Bidh na buidhnean aldehyde seo a’ tighinn còmhla ris an ath-ghnìomhaiche Schiff dearg-purpaidh gun dath, a’ cruthachadh dath purpaidh-dearg a tha a’ tasgadh far a bheil polysaccharides an làthair anns a’ chill. Canar staining acid-Schiff (PAS) bho àm gu àm ris an ath-bhualadh seo, air an robh roimhe seo mar staining glycogen.
Modh deuchainn
Stuthan:Cellulose acetatemembrane, uidheam electrophoresis(DYCP-38C agus solar cumhachd DYY-6C), Inneal luchdachadh sampall sàr-mhath (pìobaid), speactrophotometer, cuvettes dath-tomhasach, bufairean.
Bufair:
(1) pH 8.6 TEB Bufair: Cuideam 10.29 g Tris, 0.6 g EDTA, 3.2 g searbhag bòrrach, agus cuir uisge grùide gu 1000 ml.
(2) Bufair Borate: Cuidich 6.87 g borax agus 5.56 g searbhag bòrrach, agus cuir uisge grùide gu 1000 ml.
Modh-obrach:
PA 'càradh fuasgladh hemoglobin
Gabh 3 ml de fhuil anns a bheil heparin no sodium citrate mar anticoagulant. Centrifuge aig 2000 rpm airson 10 mionaidean agus cuir às don phlasma. Nigh na ceallan fala dearga trì tursan le saline fios-eòlasach (750 rpm, 5 mionaidean centrifugation gach turas). Centrifuge aig 2200 rpm airson 10 mionaidean agus cuir às don supernatant. Cuir ris an aon uiread de dh'uisge grùide, agus an uairsin cuir 0.5 uiread de charbon tetrachloride ris. Crith gu làidir airson 5 mionaidean, agus an uairsin centrifuge aig 2200 rpm airson 10 mionaidean gus am fuasgladh Hb àrd a chruinneachadh airson a chleachdadh nas fhaide air adhart.
A’ bogadh na membran
Gearr an membran ceallalose acetate gu stiallan le tomhas 3 cm × 8 cm. Soak iad ann am bufair pH 8.6 TEB gus am bi iad làn shàthaichte, an uairsin thoir air falbh agus cuir tioram le pàipear sìoltachain.
A' faicinn
Cleachd pìobaire gus 10 μl den fhuasgladh haemoglobin fhaicinn gu dìreach air an membran ceallalose acetate (an taobh garbh), mu 1.5 cm bhon oir.
Electrophoresis
Thoir am fuasgladh bufair borate a-steach don t-seòmar electrophoresis. Cuir an membran ceallalose acetate leis an taobh spotach aig ceann catod an t-seòmair. Ruith aig 200 V airson 30 mionaid.
Elution
Gearr a-mach na sònaichean HbA agus HbA2, cuir iad ann an tubaichean deuchainn air leth, agus cuir 15 ml agus 3 ml de dh'uisge grùide fa leth ris. Crith gu socair gus an hemoglobin a lughdachadh gu tur, an uairsin measgachadh.
Dath-tomhais
Zero an sùghadh le bhith a’ cleachdadh uisge grùide airson am fuasgladh elution agus tomhas an sùghadh aig 415 nm.
Àireamhachadh
HbA2(%) = gabhail a-steach tiùb HbA2 / (A’ gabhail a-steach tiùb HbA × 5 + gabhail a-steach tiùb HbA2) × 100%
Àireamhachadh Toraidhean Deuchainneach
Raon iomraidh airson pH 8.6 TEB Buffer Cellulose Acetate Electrophoresis: HbA > 95%, HbA2 1% -3.1%
Notaichean
Cha bu chòir ùine electrophoresis a bhith ro fhada. Cha bu chòir an membran ceallalose acetate tiormachadh a-mach aig àm electrophoresis. Cuir stad air electrophoresis nuair a tha HbA agus HbA2 air an sgaradh gu soilleir. Faodaidh electrophoresis fada a bhith ag adhbhrachadh sgaoileadh còmhlan agus blurring.
Seachain a bhith a 'cleachdadh cus sampall. Faodaidh cus leaghan hemoglobin leantainn gu sgaradh còmhlan no staining gu leòr, a’ leantainn gu ìrean HbA àrdaichte gu meallta.
Cuir casg air truailleadh na membran ceallalose acetate le pròtainean.
Cha bu chòir an sruth a bhith ro àrd; Air neo, is dòcha nach bi bannan hemoglobin air an sgaradh.
An-còmhnaidh thoir a-steach sampallan bho dhaoine àbhaisteach agus hemoglobins neo-àbhaisteach aithnichte mar smachdan.
Bidh Beijing Liuyi Biotechnology a ’saothrachadh an tanca electrophoresis proifeasanta airson electrophoresis hemoglobin a tha na mhodailDYCP-38Ctanca electrophoresis membran ceallalose acetate, agus tha dà mhodail de sholarachadh cumhachd electrophoresis rim faighinn airson an tanca electrophoresis membran ceallalose acetateDYY-2CagusDYY-6CSolar cumhachd.
Aig an aon àm, bidh Beijing Liuyi Biotechnology a ’toirt seachad membran ceallalose acetate do luchd-ceannach, agus faodar meud membran ceallalose acetate a ghnàthachadh. Fàilte gus faighneachd dhuinn airson sampaill agus tuilleadh fiosrachaidh.
Tha còrr air 50 bliadhna de dh’ eachdraidh aig brand Beijing Liuyi ann an Sìona agus faodaidh a ’chompanaidh toraidhean seasmhach agus àrd-inbhe a thoirt seachad air feadh an t-saoghail. Tro bhliadhnaichean de leasachadh, tha e airidh air do roghainn!
Tha sinn a-nis a’ coimhead airson com-pàirtichean, tha fàilte air an dà chuid tanca electrophoresis OEM agus luchd-sgaoilidh.
Ma tha plana ceannach sam bith agad airson ar bathar, na bi leisg fios a chuir thugainn. Faodaidh tu teachdaireachd a chuir thugainn air post-d[post-d fo dhìon]neo[post-d fo dhìon], no cuir fòn thugainn aig +86 15810650221 no cuir Whatsapp +86 15810650221, no Wechat: 15810650221
Ùine puist: Sultain-20-2023