Prionnsabal
Tha electrophoresis film cellulose acetate na dhòigh electrophoresis a ’cleachdadh film ceallalose acetate mar thaic. Canar electrophoresis ris an iongantas anns a bheil gràinean fo chasaid a’ gluasad a dh’ ionnsaigh an dealan eile fo ghnìomhachd raon dealain. Leis gu bheil puing isoelectric sònraichte aig gach pròtain, ma thèid pròtain a chuir ann am fuasgladh le pH nas ìsle na a phuing isoelectric, thèid am pròtain a ghearradh gu deimhinneach agus gluaisidh e a dh ’ionnsaigh an dealan àicheil. Air an làimh eile, gluaisidh e chun phòla adhartach. Leis gu bheil astar moileciuil pròtain a’ gluasad ann an raon dealain co-cheangailte ris an cosgais aca, cumadh agus meud nam moileciuilean, faodar diofar phròtainean a sgaradh le electrophoresis. Tha measgachadh de phròtainean ann an serum, agus tha puingean isoelectric aca uile aig pH7.5 no nas lugha. Nuair a thèid serum a chuir ann am bufair pH 8.6 gus electrophoresis a ruith, tha cosgais àicheil air a h-uile pròtanan serum agus gluaisidh iad a dh’ ionnsaigh an taobh dheimhinneach anns an raon dealain. Leis gu bheil cosgaisean eadar-dhealaichte aig diofar phròtainean serum aig an aon pH, tha na mìrean moileciuil ann am meud eadar-dhealaichte, agus mar sin tha astar imrich eadar-dhealaichte, agus tha iad air an sgaradh le electrophoresis. Tha na puingean isoelectric agus cuideaman moileciuil de phròtainean serum air an sealltainn sa chlàr gu h-ìosal:
| Pròtain | Puingean isoelectric (PI) | Molecular cuideam |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-gloulin | 6.85~7.50 | 156 000 ~ 300 000 |
Is e an deuchainn diofar phròtainean ann an serum fala a sgaradh le membran ceallalose acetate (abbr. CAM) mar mheadhan taic. Is e seòrsa de loos foamed a th’ ann an CAMefilm le deagh èideadh, agus tha an tighead 0.1mm-1.5mm, aig a bheil sùghadh uisge sònraichte.
Stuthan, ionnstramaidean agus ath-bheachdan airson electrophoresis CAM
Eisimpleirean:serum fuil daonna fallain
Ionnsramaid:solar cumhachd DYY-6C, tanca electrophoresis DYCP-38C, sampall nas fheàrr a ’luchdachadh WD-9404
Na h-ath-bheothaichean
1) membran ceallalose acetate 7X9cm
2) Fuasgladh bufair PH 8.6 barbitol (neart ianach 0.05-0.09, is e àm 0.06tid a th 'ann.): Gabh 1,84g searbhag Diethyl barbituric, agus an uairsin gabh 1.03g Diethyl sodium pentobarbital, cuir beagan uisge grùide gu teas gus a sgaoileadh, agus dèan suas ri 1000 ml;
3) Stain: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, cuir 100ml uisge grùide;
4) TBS / T no PBS / T: 45ml 95% ethanol, searbhag acetic eigh-shruthach 5ml, cuir 50ml uisge grùide ris;
5) Fuasgladh glanaidh: 70ml ethanol anhydrous, searbhag acetic eigheachail 30ml.
Dèan deuchainn air Method
1) Ullaich an membran: bog an membran a-steach don fhuasgladh bufair barbitol 30min-8h, agus thoir a-mach e, thoir air falbh am fuasgladh a bharrachd le pàipear sùghaidh.
2) A 'luchdachadh samples: Dèan eadar-dhealachadh air taobh garbh agus taobh rèidh na membran, agus comharraich loidhne aig astar 1.5cm chun a' cheann shuas air an taobh garbh. Luchdaich sampaill le inneal luchdachadh sampall adhartach air an taobh garbh. Nota: Bu chòir na sampallan a luchdachadh air taobh garbh na membran. Às deidh na sampallan serum a dhol a-steach gu h-iomlan a-steach don membran, tionndaidh thairis air an membran, cuir an taobh garbh (le sampallan) aghaidh sìos chun tanca, agus tha an deireadh le sampallan air a chuir ann an electrode àicheil.
3) Electrophoresis: Tionndaidh air an solar cumhachd, 0.4～0.6m A / cm membrane, is e an ùine ruith 30-45 min. Às deidh electrophoresis a ruith, cuir dheth an cumhachd.
4) Stain agus glan: Thoir a-mach an membran bhon tanca, agus bogadhit a-steach don fhuasgladh dath airson 5 mionaidean, agus an uairsin glan e anns an fhuasgladh glanaidh a-rithist is a-rithist airson 3-4 tursan gus am bi an dath cùl-raoin soilleir. Bu chòir na pròtanan serum a bhith air an sealltainn air na bannan, agus mar as trice tha còig sònaichean ann, a’ cruthachadh ceann shuas na loidhne comharraichte, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Glèidheadh: cuir an elecrtophoresis tioramcòmhlanann am fuasgladh glanaidh airson 10-15 mionaidean, agus an uairsin thoir a-mach e agus cuir air glainne glan e, às deidh dha tiormachadh, bidh e na fhilm fhollaiseachcòmhlan.
Dèan deuchainnToradh
Tha buaidh dealachaidh shampaill serum math, agus chan eil iongantas ann an earbaill còmhlan. Bidh ath-aithris nan toraidhean ag atharrachadh mar thoradh air modhan deuchainn agus dòighean an neach-deuchainn, agus tha an ath-aithris àrd.
Co-dhùnadh
An siostam lorg electrophoresis clionaigeach luath (Tanca electrophoresisDYCP-38C,Solar cumhachdDYY-6C agus sampall nas fheàrr a ’luchdachadh WD-9404) air a thoirt a-mach le arTha a 'chompanaidh Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdcoinneachadh ri riatanasan deuchainneach,agustha na toraidhean ath-riochdachadh, sìmplidh agus luath, freagarrach airsonteagasgrannsachadh.
Beijing LiuyiTha Biotechnology Co., Ltd a’ speisealachadh ann a bhith a’ saothrachadh thoraidhean elecrtophoresis airson gnìomhachas saidheans beatha, a thatha còrr air 50 bliadhna de dh’ eachdraidh ann an Sìona agus is urrainn don chompanaidh toraidhean seasmhach agus àrd-inbhe a thoirt seachad air feadh an t-saoghail. Tro bhliadhnaichean de leasachadh, tha e airidh air do roghainn!
Tha sinn a-nis a’ coimhead airson com-pàirtichean, tha fàilte air an dà chuid tanca electrophoresis OEM agus luchd-sgaoilidh.
Airson tuilleadh fiosrachaidh mu ar deidhinn, cuir fios thugainn air post-d[post-d fo dhìon]neo[post-d fo dhìon].
Ùine puist: Samhain-14-2022